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恒溫擴增可取代變溫PCR?技術優劣勢看這里!

时间:2021-07-22     【转载】   来自:小桔燈網

近年來,隨著分子生物學技術的迅速發展,基于核酸擴增的診斷方法已大量建立并廣泛應用于人類疾病的實驗室檢測中,恒溫擴增技術便是其中一種,與其他的核酸擴增技術相比,恒溫擴增有快速、高效、特異的優點且無需專用的設備,所以它一經出現就被許多學者認為是一種有可能與PCR媲美的檢測方法。
  當前常見的等溫擴增技術有環介導等溫擴增技術、鏈替代等溫擴增技術、滾環等溫擴增技術、依賴解旋酶等溫擴增技術、依賴核酸序列等溫擴增技術、單引物等溫擴增技術和核酸快速等溫檢測放大等技術。
為了更好地有選擇地開發利用這方面技術,現就這些等溫擴增技術的原理、特點及應用進行簡要總結。

環介導等溫擴增 (LAMP )

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依賴核酸序列的擴增 (NASBA)

依賴核酸序列的擴增技術 (NASBA)是在PCR基礎上發展起來的一種新技術,是由1對帶有T7啟動子序列的引物引導的連續、等溫、基于酶反應的核酸擴增技術,反應在41℃進行,可以在2h左右將模板RNA擴增約109倍,比常規PCR法高1000倍,不需特殊的儀器。
   該技術一出現就被用于疾病的快速診斷和病人血清中HIV-1的定量檢測。盡管RNA的擴增也可以使用反轉錄PCR技術(通過反轉錄形成單鏈DNA模板),NASBA相比則有自己的優勢:可以在相對恒溫的條件下進行(一般恒溫為41攝氏度)。該技術用于醫學診斷,相對傳統的PCR技術更為穩定,準確。

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多酶等溫擴增 (MIRA )

多酶等溫快速擴增(Multienzyme Isothermal Rapid Amplification , MIRA)技術,一種模擬生物體內正常核酸擴增過程,在37℃條件下依靠多種功能蛋白協同作用下實現核酸的快速擴增。

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依賴核酸序列的擴增技術 (NASBA)是在PCR基礎上發展起來的一種新技術,是由1對帶有T7啟動子序列的引物引導的連續、等溫、基于酶反應的核酸擴增技術,反應在41℃進行,可以在2h左右將模板RNA擴增約109倍,比常規PCR法高1000倍,不需特殊的儀器。

該技術一出現就被用于疾病的快速診斷和病人血清中HIV-1的定量檢測。盡管RNA的擴增也可以使用反轉錄PCR技術(通過反轉錄形成單鏈DNA模板),NASBA相比則有自己的優勢:可以在相對恒溫的條件下進行(一般恒溫為41攝氏度)。該技術用于醫學診斷,相對傳統的PCR技術更為穩定,準確。依賴核酸序列的擴增技術 (NASBA)是在PCR基礎上發展起來的一種新技術,是由1對帶有T7啟動子序列的引物引導的連續、等溫、基于酶反應的核酸擴增技術,反應在41℃進行,可以在2h左右將模板RNA擴增約109倍,比常規PCR法高100依賴核酸序列的擴增技術 (NASBA)是在PCR基礎上發展起來的一種新技術,是由1對帶有T7啟動子序列的引物引導的連續、等溫、基于酶反應的核酸擴增技術,反應在41℃進行,可以在2h左右將模板RNA擴增約109倍,比常規PCR法高1000倍,不需特殊的儀器。

該技術一出現就被用于疾病的快速診斷和病人血清中HIV-1的定量檢測。盡管RNA的擴增也可以使用反轉錄PCR技術(通過反轉錄形成單鏈DNA模板),NASBA相比則有自己的優勢:可以在相對恒溫的條件下進行(一般恒溫為41攝氏度)。該技術用于醫學診斷,相對傳統的PCR技術更為穩定,準確。0倍,不需特殊的儀器。


該技術一出現就被用于疾病的快速診斷和病人血清中HIV-1的定量檢測。盡管RNA的擴增也可以使用反轉錄PCR技術(通過反轉錄形成單鏈DNA模板),NASBA相比則有自己的優勢:可以在相對恒溫的條件下進行(一般恒溫為41攝氏度)。該技術用于醫學診斷,相對傳統的PCR技術更為穩定,準確。依賴核酸序列的擴增技術 (NASBA)是在PCR基礎上發展起來的一種新技術,是由1對帶有T7啟動子序列的引物引導的連續、等溫、基于酶反應的核酸擴增技術,反應在41℃進行,可以在2h左右將模板RNA擴增約109倍,比常規PCR法高1000倍,不需特殊的儀器。

該技術一出現就被用于疾病的快速診斷和病人血清中HIV-1的定量檢測。盡管RNA的擴增也可以使用反轉錄PCR技術(通過反轉錄形成單鏈DNA模板),NASBA相比則有自己的優勢:可以在相對恒溫的條件下進行(一般恒溫為41攝氏度)。該技術用于醫學診斷,相對傳統的PCR技術更為穩定,準確。酸序列的擴增技術 (NASBA)是在PCR基礎上發展起來的一種新技術,是由1對帶有T7啟動子序列的引物引導的連續、等溫、基于酶反應的核酸擴增技術,反應在41℃進行,可以在2h左右將模板RNA擴增約109倍,比常規PCR法高1000倍,不需特殊的儀器。


該技術一出現就被用于疾病的快速診斷和病人血清中HIV-1的定量檢測。盡管RNA的擴增也可以使用反轉錄PCR技術(通過反轉錄形成單鏈DNA模板),NASBA相比則有自己的優勢:可以在相對恒溫的條件下進行(一般恒溫為41攝氏度)。該技術用于醫學診斷,相對傳統的PCR技術更為穩定,準確。


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